【產(chǎn)品名稱】
Fast DNA Library?Plus?Prep Kit
【貨號/規(guī)格】
K004-A(24?次);K004-B(96?次);試用裝(6?次)
【產(chǎn)品簡述】
本試劑盒針對?Illumina?高通量測序平臺,提供了一管式便捷、通用的?DNA?文庫構(gòu)建方案,將片段化、末端補平和末端加?A?結(jié)合到一個步驟,大大縮短了建庫的時間、減少了繁瑣步驟造成的誤差,片段化和末端修復(fù)后的產(chǎn)物可直接進行接頭連接,不需額外純化,后續(xù)操作和#K001?Fast DNA Library Prep Kit操作相同。完整的文庫定量可將文庫稀釋至合適濃度,用雙鏈?DNA?熒光染料方法(如Thermo Qubit Flex Fluorometer)或?qPCR?絕對定量方法。
【樣本類型】
表?1?常用DNA推薦投入量
應(yīng)用 |
樣本類型 |
推薦投入量 |
全基因組測序 |
高質(zhì)量復(fù)雜基因組 |
50ng-1μg |
全外顯子靶向捕獲測序 |
高質(zhì)量復(fù)雜基因組 |
10ng-1μg |
全基因組靶向捕獲測序 |
FFPE DNA |
≥50ng |
全基因組測序 |
微生物基因組 |
1ng-1μg |
全基因組測序(PCR-free) |
高質(zhì)量?DNA |
≥50ng(不分選) ≥200ng(分選) |
推薦使用?TE?或超純水溶解?DNA?樣品,如樣品中含有?EDTA,則需磁珠純化或加入一定體積的?Neutralization Buffer?中和。
【儲存條件及有效期】
所有試劑均應(yīng)保存于-20℃,Ligation Buffer?在低溫下會有晶體析出,屬正?,F(xiàn)象, 應(yīng)平衡至室溫后使用,產(chǎn)品有效期為?12?個月。
【組成成分】
組分 |
24 rxns |
96 rxns |
FEP Buffer |
120?μl |
4×120?μl |
FEP Enzyme Mix |
240?μl |
4×240?μl |
Fast DNA Ligase |
120?μl |
4×120?μl |
Fast Ligation Buffer |
600?μl |
4×600?μl |
2× HIFI Library PCR Master Mix |
600?μl |
4×600?μl |
Primer Mix* |
120?μl |
4×120?μl |
Neutralization Buffer |
120?μl |
4×120?μl |
*FEP Buffer?為片段化、末端修復(fù)的反應(yīng)?buffer,F(xiàn)EP Enzyme Mix?為片段化、末端修復(fù)相關(guān)酶混合物。
*若有多個樣本,則推薦使用#K002?和#K003?接頭引物組合,本試劑盒提供一套含?index?的引物。
備注:分選磁珠推薦使用#NC1011?GDSPure?DNA Selection Magbeads?或?AMPure XP beads。