PowerScript RT SuperMix
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貨號(hào)/規(guī)格：R1081/100 rxns, R1082/500 rxns, R1083/2500 rxns
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產(chǎn)品說(shuō)明
PowerScript RT SuperMix是一種優(yōu)化的5X逆轉(zhuǎn)錄混合物，包含兩步法RT- qPCR工作流程中第一鏈cDNA合成所需的所有成分。它含有耐熱性逆轉(zhuǎn)錄酶，支持在高溫下的cDNA合成。同時(shí)含有鼠源RNase抑制劑保護(hù)模板RNA不被降解?；旌衔镏邪碾S機(jī)六聚體和Oligo dT引物，可以充分進(jìn)行各類(lèi)RNA的逆轉(zhuǎn)錄。本品可對(duì)低至單拷貝的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生的cDNA產(chǎn)物是qPCR檢測(cè)的理想模板，保證檢測(cè)的靈敏和準(zhǔn)確。
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產(chǎn)品組分
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組分 |
R1081（100?rxns） |
R1082（500?rxns） |
R1083（2500?rxns） |
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PowerScript RT SuperMix? |
400 μL |
400 μL×5 |
10 mL |
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保存條件
-20℃保存，有效期2年。
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適用范圍
第一鏈cDNA 合成
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注意事項(xiàng)
l?成功的cDNA合成來(lái)自高質(zhì)量的RNA。高質(zhì)量的RNA至少應(yīng)保證全長(zhǎng)的完整性并且不含逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制劑，如EDTA或 SDS。
l?檢測(cè)所需的RNA量取決于感興趣轉(zhuǎn)錄物的豐度。一般情況下，建議總RNA為1?ng?~ 1 μg或mRNA 0.1?ng?~ 100 μg。
l?在操作過(guò)程中，注意防止引入RNase導(dǎo)致RNA降解。RNA最好保存于-70℃，避免反復(fù)凍融。
l?基因組DNA或過(guò)量產(chǎn)品的存在會(huì)干擾目標(biāo)RNA的準(zhǔn)確定量，特別是對(duì)于低拷貝目標(biāo)。無(wú)RT對(duì)照反應(yīng)可以通過(guò)將PowerScript RT SuperMix在95℃下熱失活1分鐘再添加模板RNA來(lái)模擬無(wú)逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)；此外，應(yīng)設(shè)置NTC（無(wú)模板對(duì)照）反應(yīng)，以證明逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)是有意義的。
l?cDNA產(chǎn)物應(yīng)置于-20℃或以下保存，避免反復(fù)凍融。