T4 DNA Ligase, HC
貨號/規(guī)格：E1014-D/5,000 Weiss U
濃度：30 Weiss U/μL
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產(chǎn)品簡介
T4 DNA Ligase催化雙鏈 DNA 或 RNA 中并列的 5'-磷酸和 3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵。該酶可修復(fù)雙鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的單鏈缺口，將 DNA 片段與粘性末端或平末端連接結(jié)合，但對單鏈核酸無活性。
T4 DNA 連接酶需要 ATP 作為輔因子。
產(chǎn)品組成
| 組分 | E1014-D |
| T4 DNA Ligase, HC (30 Weiss U/μL) | 167 μL |
| 10X T4 DNA Ligase?Buffer | 1.5 mL ×?5 |
| 50% PEG | 1.5 mL ×?5 |
儲存條件
保存于-20°C。
來源
重組 E. coli?菌株，含有從噬菌體 T4 克隆的基因 30。
單位定義
1個?Weiss 單位是指在 37°C 下 20 分鐘內(nèi)催化 1 nmol 的 [32PPi] 轉(zhuǎn)化為可吸附形式所需的酶量。在以下混合物中測定酶活性：
66 mM Tris-HCl （pH 7.6）、6.6 mM MgCl 2、0.066 mM ATP、10 mM DTT、3.3 μM [32PPi]。1個?Weiss 單位相當(dāng)于大約 200 個粘性末端連接單位（CEU）。1個CEU是指在特定條件下（即在16°C下30分鐘內(nèi)），將λ（lambda）DNA的HindIII片段連接達(dá)到50%所需的酶量。
適用范圍
? 克隆限制性內(nèi)切酶生成的 DNA 片段
??克隆 PCR 產(chǎn)物
? 將雙鏈寡核苷酸連接子或接頭與 DNA 相連
? 定點突變
? 擴增片段長度多態(tài)性 (AFLP)
? 連接酶介導(dǎo)的 RNA 檢測
? 雙螺旋 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜交體中的缺口修復(fù)
? 線性 DNA 的自環(huán)化