DNase I, RNase-Free, HC
貨號(hào)/規(guī)格：E1018-A/1,000 U
濃度：50 U/μL
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
DNase I（無(wú) RNase）是一種可酶切單鏈和雙鏈 DNA 的核酸內(nèi)切酶。它水解磷酸二酯鍵，產(chǎn)生帶有 5'-磷酸基團(tuán)和 3'-OH 基團(tuán)的單脫氧核糖核苷酸和寡脫氧核糖核苷酸。
該酶的活性嚴(yán)格依賴于 Ca2+，由 Mg2+?或 Mn2+?離子活化。
在 Mg2+?存在時(shí)，DNase I 以統(tǒng)計(jì)意義上隨機(jī)的方式獨(dú)立切割 dsDNA 各鏈。Mn2+?存在時(shí)，該酶幾乎在同一位點(diǎn)切割兩條 DNA 鏈，產(chǎn)生帶有平末端或僅一或兩個(gè)核甘酸的突出端的 DNA 片段。
產(chǎn)品組成
| 組分 | E1018-A |
| DNase I, RNase-Free, HC?(50 U/μL) | 20 μL |
| 10X DNase I?Buffer (Mg2+?Plus) | 1 mL |
| EDTA (50 mM) | 1 mL |
儲(chǔ)存條件
保存于-20°C。
來(lái)源
重組 E. coli?菌株，含有編碼牛 DNase I 的克隆基因。
單位定義
一個(gè)單位是指在37°C下1分鐘內(nèi)完全降解 1 μg質(zhì)粒 DNA所需的酶量。
在以下混合物中測(cè)定酶活性：
10 mM Tris-HCl（25°C 時(shí) pH 7.5）、2.5 mM MgCl?2、0.1 mM CaCl?2、1 μg pUC19 DNA。一個(gè) DNase I 單位相當(dāng)于 0.3 Kunitz 單位。
特點(diǎn)
? 重組酶
? 從非動(dòng)物宿主純化而來(lái)，內(nèi)源性 RNase 水平較低
適用范圍
? 制備不含 DNA 的 RNA
? 體外轉(zhuǎn)錄后去除模板 DNA
? 在進(jìn)行 RT-PCR 和 RT-qPCR 之前制備無(wú) DNA 的 RNA
? 與 DNA 聚合酶 I 配合，通過(guò)缺口平移進(jìn)行 DNA 標(biāo)記
??采用 DNase I（無(wú) RNase）足跡法進(jìn)行 DNA-蛋白相互作用研究
? 生成隨機(jī)重疊 DNA 插入片段文庫(kù)。使用含有 Mn2+?的反應(yīng)緩沖液